實驗原理
細(xì)胞凋亡檢測的方法很多,我們采用的Annexin V/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡的原理:磷脂酰絲氨酸(Phosphatidyl serine, PS)正常位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),但在細(xì)胞凋亡的早期,PS可從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面,暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-V是一種分子量為35~36KD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與PS高親和力特異性結(jié)合。將Annexin-V進(jìn)行EGFP融合、熒光素(FITC、PE)或biotin標(biāo)記,以標(biāo)記了的Annexin-V作為熒光探針。(如下圖所示)
實驗流程
結(jié)果展示