實(shí)驗(yàn)原理
IP技術(shù)(RNA Binding Protein Immunoprecipitation Assay,RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀),是研究細(xì)胞內(nèi)RNA與蛋白結(jié)合情況的技術(shù),是了解轉(zhuǎn)錄后調(diào)控網(wǎng)絡(luò)動(dòng)態(tài)過程的有力工具。RIP這種新興的技術(shù)運(yùn)用針對(duì)目標(biāo)蛋白的抗體把相應(yīng)的RNA-蛋白復(fù)合物沉淀下來(lái),經(jīng)過分離純化就可以對(duì)結(jié)合在復(fù)合物上的RNA進(jìn)行分析。RIP可以看成是普遍使用的染色質(zhì)免疫沉淀ChIP技術(shù)的類似應(yīng)用,但由于研究對(duì)象是RNA-蛋白復(fù)合物而不是DNA-蛋白復(fù)合物,RIP實(shí)驗(yàn)的優(yōu)化條件與ChIP實(shí)驗(yàn)不太相同(如復(fù)合物不需要固定,RIP反應(yīng)體系中的試劑和抗體絕對(duì)不能含有RNA酶,抗體需經(jīng)RIP實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證等等)
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
1、在RNA調(diào)控區(qū)上找到RBP結(jié)合的直接證據(jù),可鑒定RBP的結(jié)合RNA motif預(yù)測(cè),核酸檢驗(yàn)方面具有更強(qiáng)的說服力
2、采用qRT-PCR檢測(cè),具有更高的精密度
3、提供各項(xiàng)完整對(duì)照,具有更嚴(yán)謹(jǐn)?shù)慕Y(jié)果
4、結(jié)果提供SCI標(biāo)準(zhǔn)Figure,可直接用于文章
服務(wù)流程
1、根據(jù)研究目的決定研究方案,設(shè)計(jì)檢測(cè)引物
2、處理、提取細(xì)胞總蛋白復(fù)合物
3、IP實(shí)驗(yàn)
4、qRT-PCR檢驗(yàn)(若需測(cè)序分析請(qǐng)另外咨詢)
5、數(shù)據(jù)分析及Figure制作
結(jié)果展示